收藏本页 | 设为主页 | 随便看看 | 手机版
普通会员

上海广锐生物科技有限公司

中药对照品,植提标准品,elisa操作,试剂盒说明书,国产elisa|试剂,抗体厂家,

产品分类
联系方式
  • 联系人:曹经理
  • 电话:021-35323056
  • 邮件:shgrsw@126.com
  • 手机:18916452679
站内搜索
 
荣誉资质
  • 暂未上传
友情链接
您当前的位置:首页 » 新闻中心 » 尿微量白蛋白实验的原理
新闻中心
尿微量白蛋白实验的原理
发布时间:2017-08-15        浏览次数:1219        返回列表
 尿微量白蛋白实验的原理:
   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠尿微量白蛋白(mALB)水平。用纯化的大鼠尿微量白蛋白(mALB)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入尿微量白蛋白(mALB),再与HRP标记的尿微量白蛋白(mALB)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的尿微量白蛋白(mALB)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠尿微量白蛋白(mALB)浓度。

样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。